服務(wù)介紹：

甘油三酯被脂蛋白酯酶(LPL)水解為甘油和脂肪酸，甘油經(jīng)甘油激酶(GK)和三磷酸腺苷(ATP)磷酸化為3-磷酸甘油(G-3-P)，后被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并產(chǎn)生過氧化氫，再經(jīng)過氧化物酶(POD)、4-氨基安替比林(4-AAP)與酚(三者合稱PAP)反應(yīng)，生成紅色苯醌亞胺(Trinder反應(yīng))，苯醌亞胺的最大吸收在510nm波長處，吸光度與樣本中甘油三酯含量呈正比，可通過酶標(biāo)儀在500~520nm處進(jìn)行比色測定。本試劑盒用于人或動物的血清、細(xì)胞、組織等樣本中的甘油三酯含量定量測定。

實驗結(jié)果展示：

實驗流程：

試劑盒：

1、樣本接收：血清、血漿、細(xì)胞、組織、腦脊液

2、實驗步驟：

(1)工作試劑的配制： 配制GPO-PAP工作液：將緩沖液和酶試劑按4:1體積比混合均勻即成。

(2)半自動生化分析儀TG測定操作

計算公式：

血清、血漿等液體樣本(空白調(diào)零)：

TG(mmol/L)=(待測管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×1.7mmol/L

細(xì)胞、組織等樣本(空白調(diào)零)：

TG(mmol/g)=(待測管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×1.7mmol/L÷待測樣本蛋白濃度(mg/ml)

實驗結(jié)果：全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求：

以下所有樣本必須盡量新鮮!

1.動植物組織樣本(干冰運輸)

準(zhǔn)確稱取動物組織重量，按重量(mg): 體積(L)=1:9 的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦 0.86% 或 0.9% 的生理水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500-3000r/min，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測定。

2.血清樣本(干冰運輸)

全血標(biāo)本請于室溫放置2h或4℃過夜后于 2-8℃3000r/min離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于 -20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

3.血漿樣本(干冰運輸)

可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30min內(nèi)于2-8℃3000r/min離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

4.細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來，接著將培養(yǎng)液3000r/min離心 10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000r/min離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于2-8℃3000r/min離心15min取上清，上清立即用于實驗，或分裝后于-20或-80保存。避免反復(fù)凍融。

5.全血樣本(4℃運輸)

EDTA抗凝管取適量抗凝全血時，EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL，樣本量不可太多或太少，取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運輸，不可與冰袋直接接觸，不可猛烈撞擊?？鼓獌H用于血常規(guī)檢測，不可運輸后再離心取血漿。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！