鐵是人體必需的微量元素之一，也是人體中含量最多的微量元素。鐵離子通常以三價(jià)鐵形式與轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，通過轉(zhuǎn)鐵蛋白通道進(jìn)入細(xì)胞，被金屬還原酶STEAP3還原成二價(jià)鐵后，參與后續(xù)多種生理和生化過程。機(jī)體內(nèi)鐵元素的缺乏會引發(fā)各種缺鐵性疾病，如貧血、免疫力低下等，此外還會導(dǎo)致消化不良、記憶力低下等消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)疾病。然而，盡管鐵元素對于機(jī)體如此重要，卻也不是越多越好的。

進(jìn)入細(xì)胞的鐵被還原成亞鐵離子后，會優(yōu)先形成各種鐵結(jié)合復(fù)合物，參與到各項(xiàng)生理和生化反應(yīng)中去。當(dāng)這些復(fù)合物含量接近飽和時(shí)，多余的二價(jià)鐵會在細(xì)胞中積累，形成不穩(wěn)定鐵池。鐵池中游離的二價(jià)鐵參與芬頓反應(yīng)，生成以羥基自由基為代表的活性氧（ROS）物質(zhì)，積累的ROS將膜脂過氧化，從而造成細(xì)胞功能喪失和細(xì)胞死亡。這是細(xì)胞鐵死亡的經(jīng)典調(diào)控途徑之一。

動(dòng)物組織或細(xì)胞提取物中非血紅素鐵含量的多少，反應(yīng)出細(xì)胞或組織貯存鐵含量的變化。非血紅素鐵含量的測定可避免總鐵含量測定中樣品內(nèi)血紅素鐵的影響。

非血紅素鐵檢測試劑盒與總鐵測定方法相似，但樣品須經(jīng)酸和熱處理，經(jīng)離心后非血紅素鐵釋放到上清液中，而含血紅素鐵的蛋白則留在沉淀中。其測定原理是動(dòng)物組織或細(xì)胞經(jīng)組織消化液在酸性加熱條件處理后，經(jīng)離心可分離出血紅素鐵和非血紅素鐵，非血紅素鐵再被還原劑還原為二價(jià)鐵后與紅菲咯啉生成紅色化合物，在500~550nm有強(qiáng)吸收，可通過酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)測定。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。